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          2. 首頁 > 產品學術 > 學術論文    肉蓯蓉組織培養及毛狀根誘導的初步研究
            【摘要】:肉蓯蓉(Cistanche deserticols Ma)為列當科肉蓯蓉屬植物。其主要活性成分為苯乙醇甙類化合物。為解決肉蓯蓉資源匱乏,滿足人們需求,本文開展了利用肉蓯蓉細胞培養技術生產苯乙醇甙類化合物的可行性研究,以及對肉蓯蓉懸浮培養體系中苯乙醇甙合成的調控研究,并對肉蓯蓉毛狀根的培養進行了初步研究。 利用細胞團克隆法篩選出穩定的肉蓯蓉高產愈傷組織,培養基配方為B5+CH(500mg/L)+IAA(2 mg/L)+BA(1 mg/L),生長周期為25d,干重達到13.2g/L,其苯乙醇甙含量達到干重的12.9%。HPLC 檢測結果表明其苯乙醇甙類化合物各成分與野生中一致,均有所提高。 建立了肉蓯蓉細胞懸浮培養體系,培養基配方為MS+GA3 (10mg/L)+BA(0.5mg/L) +CH( 800 mg/L),生長周期為36d,生長曲線呈“S 型”。干重達到15.4g/L,其苯乙醇甙含量達到干重的2.4%,與野生中含量幾乎相等。HPLC 檢測結果表明其主要成分較野生肉蓯蓉復雜。 兩種非生物誘導子茉莉酸甲酯和水楊酸都能誘導肉蓯蓉懸浮培養細胞苯乙醇甙的生物合成。誘導子的作用效果與誘導子的濃度和添加時間有關。與未經誘導子處理的細胞培養結果相比,MJ 在對數生長初期(培養14d),添加濃度為5μmol/L 條件下,對細胞干重無抑制作用,可使肉蓯蓉懸浮細胞系中PeG 含量提高2.59 倍;而SA 在對數生長后期(培養28d),添加濃度為50μmol/L 條件下,對細胞干重有抑制作用,但可使PeG含量提高2.71 倍。經兩種誘導子處理的肉蓯蓉細胞中,PAL 酶活性均明顯增強。 利用發根農桿菌感染肉蓯蓉愈傷組織,誘導出了毛狀根,但其誘導率低,且生長慢,無分支。PCR 檢測結果表明,此毛狀根是由TL-DNA 轉化所產生。本試驗表明,利用毛狀根技術生產肉蓯蓉中苯乙醇甙類化合物,還需進一步探討。
            【關鍵詞】:肉蓯蓉苯乙醇甙植物細胞培養誘導子毛狀根
            【學位授予單位】:西北農林科技大學
            【學位級別】:碩士
            【學位授予年份】:2005
            【分類號】:S567.239
            【DOI】:CNKI:CDMD:2.2005.111624

             

             

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