1. <legend id="ezbub"></legend>
          1. <optgroup id="ezbub"></optgroup>
          2. 首頁 > 產品學術 > 學術論文    水蛭地龍提取液促纖溶腦保護作用實驗研究
            【中文摘要】目的:通過腦微血管內皮細胞(Brain microvascular endothelial cells BMEC)細胞培養為實驗模型,從體外直接觀察水蛭地龍提取液能否激活內源性纖溶系統,即能否促進培養的 BMEC 分泌組織型纖溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator t-PA),同時增加其活性,及對纖溶酶原激活劑抑制物-1(plasminogen activator inhibitor PAI-1)分泌及其活性的影響。從而揭示該制劑對缺血性腦血管疾病的作用機制。 方法:采用體外培養鼠大腦皮質腦微血管內皮細胞為實驗模型,并用水蛭地龍提取液干預。培養鼠腦微血管內皮細胞,分實驗組和對照組,各組均為 9 孔細胞,按 3×104個細胞/孔接種,培養至第 9 天細胞長滿孔底。實驗組中加入不同濃度的水蛭地龍提取液 10mg/ml、20mg/ml、80mg/ml 稀釋濃度;另以 20mg/ml 濃度水蛭地龍提取液分別處理 BMEC 8h、24h、48h。實驗選取多項指標觀察水蛭地龍提取液,對各個實驗組 BMEC 分泌 t-PA 和 PAI-1 的影響:倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長情況、測定 t-PA 和 PAI-1 的活性和含量、以 RT-PCR 檢測兩者的 mRNA 的表達情況。 結果:⑴ 水蛭地龍提取液可促進 BMEC 生長,藥物處理組接種時貼壁早,且分裂增殖快,聚集成簇,細胞胞體更大,細胞大多呈多邊形。⑵ 不同濃度水蛭地龍提取液組,與正常對照組間比較,均能使 BMEC分泌的 t-PA 活性明顯增加(P<0.01),隨著處理藥物濃度增加,t-PA活性也相應增加,但各藥物處理組對 PAI-1 活性無明顯影響(P>0.05)。⑶ 水蛭地龍提取液(20mg/ml)處理 BMEC 8h、24h、48h,各相應時間點藥物處理組與對照組比較,均能增加 BMEC 分泌的 t-PA 活性(P<0.01)。且隨著處理時間的延長,t-PA 活性增加愈明顯,當藥物處理達 48h t-PA 活性達高峰,而對 PAI-1 活性無明顯影響(P>0.05)。⑷通過對 BMEC 培養上清液中 t-PA 抗原含量定量分析,表明水蛭地龍提取液可明顯增加 BMEC 分泌 t-PA 含量(P<0.05)。⑸ 用 RT-PCR 技術對t-PA 和 PAI-1 mRNA 表達進行檢測,發現水蛭地龍提取液對培養 BMEC,在轉錄水平使 t-PA 的 mRNA 表達增強,但對 PAI-1 mRNA 的表達沒有顯著影響。⑹ 免疫細胞化學證實隨水蛭地龍提取液濃度的增加,t-PA表達表達增強。 結論:通過以上實驗,可以得出以下結論:①水蛭地龍提取液促進 BMEC 生長,藥物處理組接種時貼壁早,且分裂增殖快,聚集成簇,細胞胞體更大,細胞大多呈多邊形。②水蛭地龍提取液增加 BMEC 分泌的 t-PA 活性,但對 PAI-1 活性無明顯影響。③ 通過對 BMEC 培養上清液中 t-PA 抗原含量測定,表明水蛭地龍提取液可明顯增加 BMEC 分泌t-PA 含量。④ 用 RT-PCR 技術對 t-PA 和 PAI-1 mRNA 表達進行檢測,發現水蛭地龍提取液對培養 BMEC,在轉錄水平使 t-PA 的 mRNA 表達增強,但對 PAI-1 mRNA 轉錄沒有影響??傊?,體外實驗研究發現水蛭地龍提取液可促進 BMEC 分泌 t-PA、增加其活性、增強 mRNA 轉錄,表明水蛭地龍提取液可促進纖溶系統功能活躍,而不影響抗纖溶系統穩定狀態。重慶醫科大學研究生學位論文 5第 二 部 分水蛭地龍提取液對缺氧引起大腦皮質神經細胞毒性損害保護作用的實驗研究摘 要目的:本實驗從細胞水平,觀察水蛭地龍提取液抑制缺氧誘導大腦皮質神經細胞壞死和調亡的作用,為臨床治療缺血性腦血管疾病提供更多的實驗依據。方法:本實驗制備體外培養鼠大腦皮質神經細胞缺氧模型,選擇多項觀察指標包括倒置顯微鏡下觀察正常和缺氧神經細胞生長情況、反映細胞損害經典指標乳酸脫氫酶(LDH)釋放率的測定及用 Annexin Ⅴ-PI 雙染色法流式細胞儀進行壞死、凋亡細胞計數等。結果: ⑴ 初種神經細胞 2h 開始貼壁,48h 后可見大部分細胞貼壁,細胞形態比較單一呈圓球形,偶見細胞長出突起。第 5 天神經元中混雜較多膠質細胞,換 N2 培養液抑制雜細胞生長,至第 11 天,神經細胞則生長旺盛,胞體變大,長出 2-3 個突起,突起變長,與鄰近的神經元的胞體或突起形成突觸,大部分膠質細胞死亡浮起,神經細胞純化達 95%以上。⑵ 缺氧模型的建立:用于實驗的神經細胞置于 95%N2 和 5% CO2混合氣體培養盒中繼續培養,血氣分析表明,常氧、缺氧12h 和缺氧 24h 培養上清液中的氧分壓分別為的 16.7kPa(125mmHg)、2.8 kPa(21mmHg)和 2.4 kPa(18mmHg),結合細胞生長情況,缺氧 12h適合用作缺氧模型。⑶ 缺氧處理后細胞乳酸脫氫酶釋放率測定顯示,缺氧組乳酸脫氫酶釋放率明顯高于正常對照組(P <0.01)。水蛭地龍
            星論文網版權所有
            http://www.starlunwen.com/ 未經許可,請勿發布,  原文網址:http://www.starlunwen.com/article/html/46936.html

             

             

            上一篇:免疫活性地龍肽的制備及其對小鼠NK細胞活性的影響

            下一篇:論地龍膠囊對急性腦梗死患者血漿纖維蛋白原的影響


            云南永孜堂制藥有限公司注冊地址:云南省昭通市昭陽區工業園區(火車站連接線)      聯系電話:0870-2851633      傳真:0870-2851633
            對外營銷駐昆機構地址:云南省昆明市高新區鑫園小區別墅15A幢1-3層                       聯系電話:0871-63648999    傳真:0871-63633499
            Copyright ? 云南永孜堂制藥有限公司. www.wiqiw.com All Rights Reserved.
            玩弄漂亮少妇高潮白浆,中文字幕色婷婷在线视频,98在线视频噜噜噜国产,韩国专区福利在线资源,欧美viboss高清,视频二区素人人妻职场同事,国产日韩在线时看高清视频